二氧化碳培養箱的清潔、消毒和滅菌處理

二氧化碳培養(yang) 箱的清潔、消毒和滅菌處理

二氧化碳培養(yang) 箱是在普通培養(yang) 的基礎上，通過在培養(yang) 箱內(nei) 模擬形成一個(ge) 類似細胞在生物體(ti) 內(nei) 的生長環境，如合適的溫度（37°C）、恒定的二氧化碳水平（常用5%）、穩定的酸堿度（pH值7.2-7.4）、較高的相對飽和濕度（常用95%），來對細胞或組織進行體(ti) 外培養(yang) 的一種裝置。廣泛應用於(yu) 細胞學實驗、微生物學實驗、組織學實驗以及分子生物學實驗。因此，二氧化碳培養(yang) 箱的消毒、滅菌尤為(wei) 重要。 

凡混入二氧化碳培養(yang) 箱（細胞培養(yang) 環境）中，對細胞生存有害的成分或造成細胞不純的異物都應視為(wei) 汙染。細胞持續在汙染環境中生長時，輕者生長緩慢、分化變形，較嚴(yan) 重的情況則細胞增殖停止，從(cong) 瓶壁脫落，甚至死亡。不同的汙染物對細胞的影響也有差別，有的影響是長期、緩慢和潛在的，有的則在很短的時間內(nei) 抑製細胞生長，或產(chan) 生有毒物質滅細胞。根據汙染源不同主要可以分為(wei) ：生物性汙染、化學性汙染、物理性汙染和氣溶膠汙染。

這是最常見也是危害最大的汙染，如細菌、病毒、真菌，支原體(ti) 等。這些汙染源有可能是人為(wei) 帶入，或是細胞在放入培養(yang) 箱之前已經被汙染，再或者是箱體(ti) 本身沒有消毒幹淨。體(ti) 外培養(yang) 的細胞自身沒有抵抗汙染的能力，而培養(yang) 基中所加抗生素的抗微生物汙染的能力也有限，因此細胞微生物汙染一旦發生往往無法挽救。

培養(yang) 箱中許多化學物質都會(hui) 引起細胞汙染，如細胞培養(yang) 容器清洗過程中殘留的洗滌劑、加濕器中未純化的水、人為(wei) 帶入的液體(ti) 或氣體(ti) 。不同化學物質對細胞汙染是不一樣的，有的可能促進或抑製細胞生長，有的可能殺死細胞。

培養(yang) 環境中的物理因素，如溫度、放射線、振動、輻射（紫外線或熒光）會(hui) 對細胞產(chan) 生影響。物理性汙染常常被人們(men) 所忽視，或被籠統地歸為(wei) 化學性汙染。其主要是在代謝水平或分子水平上，影響細胞正常的生理過程。

氣溶膠是液體(ti) 或固體(ti) 微粒均勻地懸浮在氣體(ti) 介質中的分散體(ti) 係，當微粒是微生物時，就是微生物氣溶膠，如果這種微生物是病原性的，就是病原微生物氣溶膠。細菌、病毒等病原體(ti) 通過氣溶膠可在人與(yu) 人、人與(yu) 環境之間傳(chuan) 播。

微生物氣溶膠可分為(wei) 兩(liang) 大類：一類是飛沫核氣溶膠，另一類是粉塵氣溶膠。醫學實驗室內(nei) 許多操作都可以產(chan) 生氣溶膠，並且大多可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠，由於(yu) 其氣溶膠分子小，漂浮在空氣中、粘附於(yu) 人身上，易在空氣中擴散而汙染實驗室的空氣。

（3）清洗玻璃門：清洗箱內(nei) 的玻璃門所用的清潔劑與(yu) 清洗培養(yang) 箱內(nei) 部時使用的相同。然後用蒸餾水漂洗，從(cong) 而清除殘留的清潔劑，最後用軟布把門擦幹。

消毒是指殺死微生物的物理或化學手段，但不一定殺死其孢子。滅菌是指殺死所有微生物，當培養(yang) 箱內(nei) 細胞受到汙染時需采用滅菌措施。一般，在培養(yang) 箱內(nei) 細胞沒有汙染的情況下平均1-3個(ge) 月消毒一次。常用的三種消毒滅菌的方式是：液體(ti) 消毒劑、紫外和加熱。

（1）液體(ti) 消毒劑：選擇對培養(yang) 箱無腐蝕性的液體(ti) 消毒劑。液體(ti) 消毒劑的消毒效果好壞和很多因素有關(guan) ，比如場所的溫度、接觸時間、pH、穿透能力、有機物的反應，這些因素中一些很小的變化可能造成去汙效果的不同。因此液體(ti) 去汙劑不是可信賴的方法。

（2）紫外：一般先用蒸餾水清洗幹淨後，再用紫外燈照射（帶紫外燈的培養(yang) 箱）一天，或者用手提式的紫外燈照射。

（3）加熱：濕熱和幹熱被認為(wei) 是殺菌有效的方法。幹熱160℃-170℃、2-4小時在不具有滲透性、非有機體(ti) 的物質（如玻璃）是可行的淨化方法, 但是甚至在有機體(ti) 或非有機體(ti) 的淺層也不能被絕緣。

（3）揮發性的甲醛有毒、易燃、易爆。如果在培養(yang) 箱內(nei) 殘留甲醛的話，會(hui) 影響細胞正常生長，甚至使細胞死亡。

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